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低氧激活HIF-1α抑制人牙周膜成纤维细胞的成骨分化

摘要:目的探讨低氧环境对人牙周膜成纤维细胞(periodontalligamentcells,PDLCs)成骨分化的影响,以及低氧诱导因子?1α(hypoxiainduciblefactor?1α,HIF?1α)在该过程中的作用。方法组织块法原代分离牙周膜标本中PDLCs,采用激光共聚焦检测波形蛋白与细胞角蛋白表达。PDLCs分别在常氧(20%体积分数O2)培养以及低氧(1%体积分数O2)培养12~72h,检测常氧组与低氧组PDLCs碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性,比较成骨标志物ALP、I型胶原(Collogen?1,COL1)、成骨特异性转录因子(runtrelatedtranscriptionfactor2,RUNX2)的mRNA表达量变化,Western免疫印迹检测HIF?1α表达水平。进一步转染小干扰RNA(HIF?1α?siRNA1,2),检测低氧环境中PDLCs的HIF?1α水平、ALP活性与成骨标志物mRNA表达变化。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果组织块法成功获取PDLCs,PDLCs中波形蛋白阳性表达、细胞角蛋白阴性表达。低氧环境中培养48h后PDLCs中ALP活性下降,ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量显著降低,但HIF?1α蛋白表达升高。HIF?1α?siRNA成功敲低PDLCs中HIF?1α表达,敲低HIF?1α的PDLCs在低氧环境中的ALP活性升高,ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量增加。结论长时间低氧处理能抑制PDLCs成骨分化,敲低HIF?1α表达可逆转低氧对PDLCs成骨分化的抑制作用。

关键词:
  • 牙周炎  
  • 人牙周膜成纤维细胞  
  • 低氧  
  • 成骨分化  
作者:
庞静雯; 吴亚霖; 徐婷; 庄秀妹
单位:
广州市海珠区口腔医院; 广东广州510220; 中山大学附属孙逸仙纪念医院口腔科; 广东广州510120
刊名:
广东牙病防治

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期刊名称:广东牙病防治

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