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摘要：目的对美国罗氏公司LightCycler Nano 32孔荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪的主要性能指标进行评价。方法按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）制定的评价标准,评价仪器精密度、准确度、灵敏度、可报告范围、仪器间比对等指标。结果LightCycler Nano精密度批内变异系数（CV）为2.63%、1.51%,批间CV为6.2%、4.15%;准确度与室间质控物比较,5个标本均在靶值区间内;灵敏度检测CV≤10%;可报告范围为最大稀释比例1∶100;与比对仪器的比对结果偏差结果均小于15%。结论罗氏LightCycler Nano荧光定量PCR仪5项性能经验证后与厂家提供的性能参数相符,可以用于临床检测。

摘要：目的分析国产和进口实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）试剂检测乙型肝炎病毒（HBV）-DNA的相关性,探讨国产和进口试剂在临床应用中的差异。方法使用国产和进口试剂平行检测262例乙型肝炎（乙肝）患者血浆当中的HBV-DNA水平,国产试剂采用手工提取标本,罗氏LightCycler480Ⅱ（LC480Ⅱ）进行核酸扩增;进口试剂则采用罗氏COBAS AmpliPrep（CAP）和COBAS Taqman48（CTM）进行标本提取和扩增;对HBV-DNA病毒载量数据进行对数转换（log10）,并将两组数据进行相关分析。结果国产和进口试剂检测结果,经线性拟合,R2=0.814 3。HBV-DNA浓度在10-10^3 IU/mL的标本,R2=0.300 6;浓度在104-10^5 IU/mL的标本,R^2=0.411 8;浓度在10^6-10^8 IU/mL的标本,R^2=0.801 7。进口试剂阳性检出率为75.57%（198/262）,明显高于国产试剂阳性检出率[65.65%（172/262）]。结论国产试剂和进口试剂相比,相关性良好。HBV-DNA浓度在10^6-10^8IU/mL时,相关性最高;浓度在10^4-10^5 IU/mL时,相关性一般;浓度在10-10^3 IU/mL时相关性较差,国产试剂与进口试剂有明显差异,灵敏度有待进一步提高。

摘要：目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）中使用不同容量加样针和分液高度,对全自动加样系统加样准确度和精密度的影响。方法选取10μL和100μL两种加样量,每种加样量分4个小组进行实验,分别使用不同容量（400μL和800μL）的加样针和不同分液高度（浸润和未浸润）加样,计算每组的最终加样量、均值相对误差（E）和变异系数（CV）,与实际工作标准进行比较。结果10μL加样E在-37.9%--2.8%,CV在3.29%-14.49%;100μL加样E在-1.9%-0.8%,CV在0.44%-0.95%。结论不同容量加样针和分液高度对10μL加样影响较为明显,对100μL加样影响较小,在使用全自动加样系统进行ELISA时,应当选择适当容量的加样针和分液高度。

摘要：目的获得日本血吸虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的原核表达蛋白。方法根据GenBank中日本血吸虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的序列设计引物,以cDNA为模板聚合酶链反应（PCR）扩增该基因,将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达重组蛋白。结果成功克隆了具有完整开放阅读框的日本血吸虫丝氨酸蛋白酶抑制剂重组质粒,获得相对分子质量约44×10^3的目的蛋白。结论成功地克隆表达了丝氨酸蛋白酶抑制剂,为进一步研究该蛋白的特性、功能及免疫保护作用奠定了基础。

摘要：目的比较手性修饰的氧化石墨（GO）衍生物对小鼠成神经瘤细胞N2a活性的影响。方法倒置荧光显微镜观察N2a细胞形态,MTT法检测N2a细胞的活性。结果在0.1-0.4μmol/L浓度GO衍生物对N2a细胞活性影响呈浓度相关,其中0.4μmol/L的GO衍生物对N2a细胞生长状况最好;L-型GO（L-GO）和D-型GO（D-GO）促N2a细胞增殖率分别为94%和52%,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论手性修饰的GO衍生物在0.1-0.4μmol/L能促进N2a细胞生长,L-GO促进N2a细胞生长活性比D-GO强。

摘要：目的初步建立肾移植患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分比参考范围。方法 67例健康对照组、169例肾移植患者于肾移植手术后1周清晨采集外周血,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比。同时按年龄段划分为3组进行统计：≤30岁（青年组）、31-49岁（中年组）、≥50岁（老年组）。结果 （1）建立了肾移植术后T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比的参考范围：CD3^＋56.80%-64.54%;CD4^＋30.82%-36.43%;CD8^＋23.45%-27.32%;CD3^＋CD4^＋/CD3^＋CD8^＋1.35-1.68;NK 6.04%-8.35%。（2）肾移植术后不同性别间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异无统计学意义（P〉0.05）。（3）肾移植术后不同年龄间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异有统计学意义（P〈0.05）：与老年组比较,青年组和中年组肾移植术后CD8^＋细胞百分比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,CD3^＋CD4^＋/CD3^＋CD8^＋明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论初步建立了肾移植术后的T淋巴细胞亚群和NK细胞的参考范围,同时发现肾移植术后随年龄增长CD8＋细胞百分比降低,而CD3^＋CD4^＋/CD3^＋CD8^＋升高。

摘要：目的通过分析2013年分离的286株铜绿假单胞菌对16种抗菌药物的耐药情况,明确Ⅰ类整合子在铜绿假单胞菌多重耐药中所起的作用。方法采用纸片扩散法进行药物敏感试验,并以聚合酶链反应（PCR）进行Ⅰ类整合子的检测,用χ^2检验对Ⅰ类整合子携带率与铜绿假单胞菌多重耐药的相关性进行统计学分析。结果在分离出的286株细菌中,检出Ⅰ类整合子89株,检出率为31.1%;Ⅰ类整合子阳性株对多种抗菌药物的耐药率明显高于整合子阴性株。结论铜绿假单胞菌的耐药情况严重,Ⅰ类整合子是铜绿假单胞菌多重耐药的重要因素。

摘要：目的测定新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿脐血及外周动脉血pH值,探讨其对新生儿HIE的临床诊断价值。方法选择2011年6月至2013年6月产科自然分娩的足月新生儿917例,于出生后第1声啼哭前采集脐带血,检测脐动脉血pH值;对其中生后1min Apgar评分小于或等于7分的138例新生儿于出生1h抽取外周动脉血进行血气分析。分析其与新生儿HIE的关系。结果 917例脐动脉血pH范围为7.22-7.51,平均pH值为7.31±0.14,pH〈7.10作为预测新生儿HIE的指标时其阳性预测值为55.38%,灵敏度60.00%,特异度96.61%,脐带血联合出生后1h动脉血pH值预测HIE的阳性预测值95.74%、灵敏度88.26%,特异度97.10%。联合检测同单独检测比较,具有较高的灵敏度及阳性预测值。结论对于脐血pH〈7.10的新生儿应当于生后复查外周动脉血pH值,脐血联合生后1h动脉血pH值测定能客观评价新生儿出生时的状况,对新生儿HIE的预测具有较高的临床价值。

摘要：目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与血管内皮细胞生长因子（VEGF）在肺腺癌表达的相关性及意义。方法应用免疫组织化学（SP）法检测MMP-9、VEGF在30例肺腺癌组织和12例癌旁正常组织中的表达。Western blot检测MMP-9单克隆抗体阻断MMP-9后肺腺癌A549细胞VEGF蛋白表达水平的变化,以及VEGF克隆抗体阻断VEGF后肺腺癌A549细胞MMP-9蛋白表达水平的变化。结果MMP-9在腺癌组织表达率为63.3%,正常组织表达率为16.7%,差异有统计学意义（P〈0.05）;VEGF在腺癌组织表达率为70%,正常组织表达率为25%,差异有统计学意义（P〈0.05）;肺腺癌组织MMP-9水平与VEGF表达率存在正相关关系（r=0.709 4,P〈0.01）,并与肺腺癌的临床分期及淋巴转移状况相关（P〈0.05）。VEGF高表达率与肺腺癌的临床分期及淋巴转移状况相关（P〈0.05）。用MMP-9单克隆抗体阻断MMP-9可降低VEGF蛋白表达水平,用VEGF单克隆抗体阻断VEGF可降低MMP-9蛋白表达水平。结论 VEGF、MMP-9在肺腺癌高表达,在促进腺癌侵袭转移中具有协同作用。

摘要：目的探讨血小板-中性粒细胞聚集体（PNA）、血小板-单核细胞聚集体（PMA）检测在预测2型糖尿病并发症中的实用价值。方法应用流式细胞仪检测2型糖尿病并发肾病变患者血浆的PMA、PNA,并以无并发症的2型糖尿病患者和健康人作为对照,比较上述三组PMA、PNA的水平,用ROC曲线评价此试验的临床应用价值。结果 2型糖尿病并发肾病变组PMA、PNA水平显著高于无并发症组,而后者又显著高于健康对照。ROC曲线显示,PMA对2型糖尿病患者并发肾病变诊断临界值灵敏度为96.7%,特异性为100.0%,截断点为40.12%;PNA灵敏度为96.7%,特异性为88.3%,截断点为26.98%,可见PMA优于PNA。曲线下面积分别为0.986和0.963。结论 PMA、PNA可以预测2型糖尿病肾病变,应用流式细胞法检测其灵敏度和特异性均较满意,PMA特异性优于PNA。

摘要：目的探讨16SrDNA测序技术在新生儿、婴儿肠道微生态研究中的应用。方法于生后3天、1月、6月、1岁时收集2例健康婴儿粪便标本共8份,提取细菌总DNA,以Illumina Hiseq 2000为测序平台,采用新一代高通量16SrDNA宏基因组测序技术对V6可变区测序,并进行生物信息分析（物种分类和丰度分析;多样性分析）。结果 8份样品共产生原始测序数据为1 027.47 Mbp,Unique tags序列数量均值为58630,OTU数量63-209;优势菌门为Proteobacteria和Firmicutes;在科水平,〉1%的物种1个月之内2-4种,6月后达7-10种;1号婴儿一直以Enterobacteriaceae占优势,2号婴儿优势菌群包括Enterobacteriaceae、Lachnospiraceae、Streptococcaceae和Bacteroidaceae;4个时间点的npShannon和Simpson指数分别为1.17、1.29、2.16、2.51和0.43、0.40、0.26、0.14。结论 16SrDNA测序技术能满足新生儿、婴儿肠道微生态研究需求;新生儿、婴儿粪便中含丰富细菌基因组;细菌物种丰度及分类存在个体差异;从出生到1岁,婴儿肠道菌群结构趋向复杂和多样。

摘要：目的探讨冠心病患者肺炎衣原体（CPN）、幽门螺杆菌（Hp）、人类巨细胞病毒（HCMV）3种病原微生物的感染状况与3种血清炎症标志物[超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]水平的相关性。方法选取2012年7月至2013年12月住院的冠心病患者105例作为冠心病组,同时选择同期住院非冠心病患者76例作为对照组。检测两组CPN、Hp、HCMV 3种微生物的IgG抗体,以及血清中hs-CRP、IL-6和TNF-α浓度。结果冠心病组CPN-IgG、Hp-IgG和HCMV-IgG单阳性、双阳性和三阳性的阳性率分别为33.3%、52.3%、78.1%、41.9%、13.3%,对照组阳性率则分别为14.5%、35.5%、63.2%、23.7%、2.6%,两组的相应阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。CPN-IgG、Hp-IgG和HCMV-IgG阳性对患冠心病的危险度比值比分别为3.297、2.278、2.352,差异有统计学意义（P〈0.05）。随着冠心病的病原体感染负荷增加,3种血清炎症标志物浓度亦增加,每组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论冠心病患者存在CPN、Hp、HCMV 3种病原微生物的混合感染,长期反复慢性混合感染与冠心病关系密切,可诱导炎症标志物之间相互协同共同参与冠心病的发生、发展过程。感染性因素是冠心病的独立危险因素,对冠心病的诊断治疗有积极意义。

摘要：目的比较经超声实时定位监测与超声定位非实时监测在电磁式尿路结石碎石术的临床疗效。方法回顾性分析2005年10月至2012年10月诊断明确并行尿路结石碎石术的1 242例资料。根据碎石定位方式不同分为两组：经超声实时定位监测碎石组621例,非实时监测碎石组621例。比较两组疗效、碎石时间、排石情况、术后血尿时间、术后使用抗生素时间、术后住院时间、术后并发症等指标的差别。结果两组病例术中及术后近期均未发生严重并发症,远期并发症有待观察。超声实时定位监测碎石组碎石成功率为99.52%（618/621）,非实时监测碎石组成功率为97.42%（605/621）,两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;经超声实时定位监测碎石组碎石时间、排石情况、术后血尿时间、术后使用抗生素时间、术后住院时间、术后并发症少于非实时监测碎石组,两组比较差异有统计学意义（均P〈0.01）。结论超声定位实时监测体外冲击波碎石治疗尿路结石可减少盲目冲击对邻近组织的损伤,安全有效,无严重并发症,缩短碎石时间、术后血尿时间、术后使用抗生素时间、术后住院时间,提高排石效果,可提高治疗安全性、有效性、及时性、廉价性,值得推广。

摘要：目的分析Ⅰ型、Ⅱ型精神分裂症患者间血清脑源性神经营养因子（BDNF）水平与阳性和阴性精神症状可能的关系,为临床诊治提供一定依据。方法抽取初诊的住院或门诊符合ICD-10精神分裂症诊断标准患者共计103例,其中Ⅰ型组63例,Ⅱ型组40例,健康对照组40例。入组后使用阳性和阴性症状量表（PANSS）判别精神症状程度,抽取晨血,测定血清BDNF浓度。结果精神分裂症患者血清BDNF水平为（21.38±4.57）μg/L,低于健康对照组的（23.68±6.14）μg/L,差异有统计学意义（P〈0.05）;Ⅰ型组BDNF水平为（22.50±4.41）μg/L,明显高于Ⅱ型组的（19.61±4.31）μg/L,差异有统计学意义（P〈0.01）,Ⅱ型组BDNF水平明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。病程越长、复发次数越多,血清BDNF水平越低（P〈0.05）。结论 BDNF可能参与了精神分裂症的发生、发展过程,Ⅱ型患者精神神经生化学病因基础可能不同,可作为判断预后的临床观测指标。

摘要：目的乙二胺四乙酸（EDTA）依赖性假性血小板减少症标本通过肝素锂、枸橼酸钠及改良方案进行纠正,对血小板测定结果进行评估,建立一个简单、实用、且不延长结果报告时间（TAT）的方法。方法征集EDTA依赖性假性血小板减少症志愿者120例,同时收集肝素锂、枸橼酸钠、EDTA-K3抗凝标本各一份,其中EDTAK3标本采用改良方法处理后再检测,三组检测结果与参考方法的测定结果进行比较。评估差异有无统计学意义。结果肝素锂、枸橼酸钠、改良方案的纠正率分别为80.5%、39.2%、100.0%;与参考方法比较,P值分别0.129、0.013、0.051。TAT分别为（2.03±0.29）、（1.8±0.35）、（0.47±0.19）h。结论肝素锂组的结果与参考方法测定结果相关性最好,可比性最好。其次是改良组和枸橼酸钠组。改良方案对TAT影响最小、不用进行患者的二次采血,并且结果与枸橼酸钠相似,因此该改良方案可以用于临床上对PTCP标本的纠正。