检验医学与临床杂志   省级期刊

摘要：目的构建小鼠14-3-3ε真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应从小鼠肝组织中获得编码14-3-3ε的cDNA,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1-ZEO（＋）中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体转染HEK293细胞,并通过蛋白免疫印迹检测细胞内14-3-3ε的表达。结果构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,将其转染HEK293细胞48h后,蛋白免疫印迹检测到细胞内14-3-3ε的表达。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,为研究14-3-3ε在小鼠卵母细胞和小鼠-细胞受精卵G2/M转换中作用的研究奠定了基础。

摘要：目的宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,本研究拟在血清学和组织学水平共同探讨宫颈癌患者蛋白磷酸酯酶2A（PP2A）水平的变化。方法分别选择同期宫颈无病变健康体检者（健康对照组）30例,高危型人乳头瘤病毒（hsHPV）感染患者17例和宫颈癌患者23例,采用酶联免疫吸附试验检测血清PP2A蛋白表达水平;另选取健康对照者24例,hsHPV感染患者18例和宫颈癌患者14例,采用酶活试剂盒检测组织PP2A活性。结果与健康对照组相比,hsHPV感染组血清PP2A水平下降,差异有统计学意义（P〈0.05）,同时组织PP2A酶活性下调,PP2A活性仅为健康对照组的66%,差异有统计学意义（P〈0.05）;宫颈癌组血清PP2A水平下降明显,差异有统计学意义（P〈0.05）,同时组织酶活性显著下调,PP2A酶活性仅为健康对照组的45%,差异有统计学意义（P〈0.05）。与hsHPV感染组相比,宫颈癌组患者血清PP2A水平下调差异有统计学意义（P〈0.05）,组织酶活性水平下调差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论宫颈癌患者血清PP2A蛋白表达水平显著下调,同时组织学水平PP2A酶活性亦下降。该研究结果为宫颈癌发病机制提供了新的资料,为宫颈癌的早期诊断提供了新的靶标分子。

摘要：目的研究不同分型的急性髓系白血病（AML）患者骨髓中单个核细胞Notch1基因mRNA的表达。方法收集初诊的102例AML患者（M1型18例,M2型41例,M3型16例,M4型14例,M5型13例）和34例对照者（非白血病和健康人,其中非白血病患者和健康人Notch1基因mRNA表达无差异）骨髓,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Notch1基因mRNA表达情况。结果 102例AML患者骨髓中Notch1基因mRNA表达量相对于对照组升高了477.7倍,差异有统计学意义（t=51.0,P〈0.05）。不同分型AML患者骨髓中,M1、M2、M4、M5型AML之间Notch1基因mRNA表达量无差异,但均低于M3型,与M3差异有统计学意义（t=4.87,5.24,3.26,5.75,P〈0.05）。结论不同分型的AML患者骨髓Notch1基因表达均存在异常,并且发现M3型与其他类型AML表达有差异,该机制可能表明Notch1基因在不同亚型AML发生和发展中所起作用不同。

摘要：目的系统比较流感疫苗和肺炎球菌疫苗的联合接种与常规对症治疗对慢性阻塞性肺病患者的防治效果。方法计算机检索流感疫苗和肺炎球菌疫苗的联合接种（联合接种组）对比常规对症治疗（对照组）慢性阻塞性肺病患者的随机对照研究。2位研究者对纳入研究的质量、提取数据进行独立评价,采用Revman 5.2.7软件进行统计分析。结果纳入6个研究,总计有322例慢性阻塞性肺病患者。其中应用流感疫苗和肺炎球菌疫苗联合接种组为172例,对照组150例。Meta分析结果显示,与对照组相比,联合疫苗组能够明显降低慢性阻塞性肺病患者的平均住院天数（MD=-7.06,95%CI：-9.16-4.96,P〈0.05）、急性发作间距天数（MD=93.48,95%CI：65.55-121.41,P〈0.05）、病死率（RR=0.22,95%CI：0.08-0.61,P=0.004）、急性发作次数（MD=-3.46,95%CI：-3.76--3.16,P〈0.05）、平均住院次数（MD=-2.23,95%CI：-2.54--1.91,P〈0.05）、急性发作天数（MD=-2.71,95%CI：-4.67--0.74,P〈0.05）。结论相比对照组,联合接种组可以明显降低慢性阻塞性肺病患者的平均住院天数、急性发作间距天数、病死率、急性发作次数、平均住院次数及急性发作天数,但是低质量的原始研究可能大大降低证据的可信度,对于此课题还需要更多更科学、更可靠的临床试验去证实和研究。

摘要：目的探索乳腺癌血浆中差异表达的微小RNA（miRNA）,为检测乳腺癌寻找全新的生物标志物,并确定其诊断价值。方法采用定量反转录聚合酶反应检测训练组30例乳腺癌患者和20例健康对照者血浆中的候选标志物,再盲法验证20例乳腺癌患者和20例健康对照者候选标志物的诊断效能。结果训练组共发现6个差异表达的miRNA,其中miR-145和miR-484差异最显著,与其他4个差异有统计学意义（P〈0.05）。经盲法验证,二者联合诊断可有效区分乳腺癌患者与健康对照患者,受试者工作曲线下面积为0.965,灵敏度和特异度分别为91.3%（95%CI：85.2%-95.4%）和90.8%（95%CI：83.7%-93.6%）,阳性预测值为91.0%,阴性预测值为91.0%。结论血浆中miR-145和miR-484是乳腺癌潜在的诊断标志物。

摘要：目的探索在医疗资源有限的条件下,对癌症患者住院期间心理痛苦分层评估及干预的可行性,构建癌症患者心理痛苦管理模式。方法运用心理痛苦管理筛查工具对1 000例癌症患者住院期间心理痛苦状态进行初步筛查（第1层面）,≥4分患者采取抑郁自评量表（SDS）及焦虑自评量表（SAS）进一步评估（第2层面）,对大于或等于4分患者医护人员干预无效者,由心理治疗师或精神专科医师介入,进行专科心理评估诊断（第3层面）;与之相对应,进行心理痛苦分层干预,〈4分的患者,由责任护士给予患者教育、情感支持等心理干预,对大于或等于4分的患者,由责任护士、科室心理疏导员及主管医师根据患者病情和SDS、SAS评估结果,进行针对性和个性化心理干预,当患者心理痛苦大于或等于4分,医护人员干预无效者,由心理咨询师进行专业心理干预,必要时由精神卫生专科医师给予药物干预。结果患者入院时心理痛苦程度分值平均为（2.15±1.23）分,≥4分者83例,占8.3%。出院时心理痛苦程度分值平均为（1.12±0.53）分,≥4分者31例,占3.1%。出入院时心理痛苦程度分值差异有统计学意义（P〈0.05）。结论通过对癌症患者住院期间心理痛苦评估及干预,初步构建了癌症住院患者心理痛苦的筛查-诊断-干预分层管理模式,为临床提供较为高效、连续、可行的心理痛苦管理方案。

摘要：目的探讨不同厂家酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测人免疫缺陷病毒抗体（抗-HIV）结果的差异性。方法同时用两种不同厂家生产的第3代ELISA抗-HIV初筛试剂检测日常标本,初筛阳性结果的标本再用原来的试剂双孔复检排除假阳性,复检阳性的标本送确认实验室做免疫印迹试验（WB试验）确认。结果用A、B两种试剂共检测30批次2 166例标本,经复检A、B两种试剂仍为阳性的标本数分别为9例和19例,其中A、B两种试剂共同阳性反应的标本6例;WB试验确认2例阳性,为A、B两种试剂同时阳性。单独A试剂的阳性预测值为22.22%（2/9）,单独B试剂的阳性预测值为10.53%（2/19）,两种试剂双阳性标本的阳性预测值为33.33%（2/6）。结论不同厂家ELISA试剂检测抗-HIV结果的阳性预测值有较大差异,同时采用两种试剂检测临床标本能提高阳性预测值。

摘要：目的观察舒芬太尼联合瑞芬太尼在食管癌手术的镇痛效果及对应激反应的影响。方法将45例食管癌患者分为3组（每组15例）。Ⅰ组：舒芬太尼0.5mg/kg麻醉诱导,术中效应室靶控浓度0.2-0.4ng/mL;Ⅱ组：瑞芬太尼1.5μg/kg诱导,靶控浓度2-5ng/mL;Ⅲ组：舒芬太尼0.2μg/kg联合瑞芬太尼0.8μg/kg诱导,靶控浓度舒芬太尼0.2-0.3ng/mL、瑞芬太尼1-3ng/mL。于麻醉诱导前（T1）,插管前即刻（T2）,插管后1min（T3）、5min（T4）、分离食管后1min（T5）、5min（T6）,拔管后1min（T7）、5min（T8）,记录收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、心率（HR）值;于T1、T4、T6、T8、术后8h（T9）用酶联免疫吸附试验测定血浆儿茶酚胺及皮质醇浓度;记录术后拔管时间及30min视觉模拟评分法（VAS）评分和需要镇痛治疗患者例数。结果与T1相比,3组患者SBP、DBP、HR T2时明显下降（P〈0.05）,T3、T5、T7时明显升高（P〈0.05）,其中Ⅱ组上升幅度较Ⅰ、Ⅲ组高（P〈0.05）;Ⅱ组患者血浆去甲肾肾腺素浓度在T4、T6、T8时上升幅度明显较Ⅰ、Ⅲ组高（P〈0.05）。与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ组拔管时间较短（P〈0.05）。Ⅱ组VAS评分及需要镇痛治疗的患者例数与Ⅰ、Ⅲ组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论舒芬太尼联合瑞芬太尼用于食管癌开胸围术期有利于维持患者血流动力学稳定,降低应激反应,缩短拔管时间。

摘要：目的探讨结缔组织生长因子（CTGF）与冠状动脉粥样硬化性狭窄相关性及其临床诊断价值。方法将197例行冠状动脉造影的患者按造影结果分为冠心病狭窄组86例,非冠心病狭窄组64例,冠状动脉正常对照组47例。采用单因素方差分析探讨各组与对照组间临床基线资料和CTGF、转化生长因子β1（TGF-β1）的差异,采用Spearman分析冠状动脉粥样硬化性狭窄程度（Gensini积分与CTGF的相关性,并绘制CTGF的ROC曲线,评价其临床诊断价值）。结果对照组、冠心病与非冠心病冠状动脉狭窄组在吸烟、年龄、性别、高密度脂蛋白胆固醇及细胞因子CTGF、TGF-β1组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）;血清CTGF与Gensini积分相关（r=0.713,P=0.000）,通过分析CTGF诊断冠状动脉狭窄的ROC曲线：诊断临界值、曲线下面积、敏感度、特异度分别为：503.65pg/mL、0.973、92%、94%。结论 CTGF与冠状动脉粥样硬化性狭窄相关,血清CTGF水平可作为评估冠状动脉狭窄及严重程度的指标。

摘要：目的探讨尿白三烯E4（LTE4）和鼻咽分泌物嗜酸性细胞阳离子蛋白（ECP）对呼吸道合胞病毒（RSV）毛细支气管炎患儿治疗和预后的影响。方法选取2014年1月至2015年3月保定市第二中心医院儿科住院RSV毛细支气管炎患儿79例作为研究对象,设为RSV毛细支气管炎组,均采用常规西医治疗,选取同期涿州市健康小儿75例作为健康对照组,均检测LTE4和ECP水平,观察治疗前、后和两组之间以上指标变化情况。结果治疗前,治疗后3、7、14、21dRSV毛细支气管炎患儿LTE4水平分别为（176.35±78.24）、（164.35±71.45）、（112.45±54.62）、（67.55±25.24）、（41.35±10.57）pg/mL;ECP水平分别为（98.56±61.57）、（88.34±43.64）、（61.46±24.66）、（50.41±17.84）、（34.68±12.54）μg/L,治疗后明显低于治疗前,治疗前、后比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。治疗前健康对照组受试者LTE4、ECP水平均明显低于RSV毛细支气管炎患儿,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）;RSV患儿治疗末LTE4、ECP水平与健康对照组受试者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 LTE4和鼻咽分泌物ECP能反映出RSV毛细支气管炎患儿的治疗进展和预后情况,在临床上有一定指导意义。

摘要：目的探究超声与磁共振（MRI）在乳腺良、恶性肿块中的诊断价值。方法对苏州市吴江区第一人民医院2012年1月至2014年6月122例患者129个乳腺肿块术前均行超声及MRI检查,回顾性分析超声及MRI检查结果,并与术后病理相比较。结果 129个乳腺肿块中,通过术后病理诊断为恶性病变37个,良性病变92个。MRI检查与超声检查对乳腺肿块诊断的真阳性率、准确率、阳性预测值差异无统计学意义（P〉0.05）;超声与超声联合MRI检查对乳腺肿块诊断的真阳性率、准确率、阳性预测值差异有统计学意义（P〈0.05）;MRI检查与超声联合MRI检查对乳腺肿块诊断的真阳性率、准确率、阳性预测值差异无统计学意义（P〉0.05）。结论超声与MRI检查对乳腺良、恶性肿块的诊断均具有一定价值,超声价格低廉、操作简便,可用于对乳腺癌的筛查,而MRI对乳腺癌诊断的准确率比超声高,减少了误诊发生率,大大提高了诊断的真实性和可靠性,在经济条件允许的情况下值得临床开展应用。

摘要：目的分析过氧化酶体增殖物受体γ（PPARγ）在高糖介导血管内皮细胞活性氧（ROS）生成中的影响与机制。方法采用33.0mmol/L D-葡萄糖（高糖）进行介导的人脐静脉内皮细胞作为高糖介导组,采用二甲基亚砜处理的人脐静脉内皮细胞作为对照组。分别采用3种PPARγ激动剂吡格列酮、GW9662、京尼平作用于高糖介导组。采用一氧化氮与超氧阴离子荧光探针判定3种药物对血管内皮细胞一氧化氮与ROS的影响,采用蛋白免疫印迹法评估解耦联蛋白2表达水平。结果高糖介导组ROS与一氧化氮表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。3种药物中,吡格列酮对血管内皮细胞ROS、一氧化氮与解耦联蛋白2的作用最强（P〈0.05）。结论 PPARγ能够明显缓解高糖介导下血管内皮细胞ROS生成,主要通过上调解耦联蛋白2发挥作用。

摘要：目的研究结缔组织生长因子（CTGF）和血管内皮生长因子（VEGF）在大鼠糖尿病肾病发生和发展中的作用,探讨维格列汀对糖尿病肾病的保护机制。方法将60只大鼠分为A、B、C 3组,A、B两组给予链脲佐菌素用于制备大鼠糖尿病肾病模型组,然后分别给予维格列汀8mg/（kg·d）灌胃连续治疗8周和12周,C组为对照组,只给予生理盐水灌胃。处死大鼠,检测A、B两组大鼠血糖、24h尿蛋白定量和血清CTGF和VEGF表达水平。进一步测定肾重指数,形态学观察肾小球体积及肾小球基底膜变化,测定肾小球平均截面积（MGA）,计算肾小球平均体积（MGV）,比较其MGA和MGV。结果大鼠糖尿病组血糖、24h尿蛋白定量和CTGF、VEGF水平明显高于对照组。经维格列汀治疗后大鼠糖尿病肾病组血糖、24h尿蛋白定量和CTGF、VEGF水平显著下降,治疗12周后以上各项指标比治疗8周下降更明显,肾重指数降低,肾脏肥大程度减轻,且治疗前、后CTGF和VEGF水平呈正相关。结论 CTGF和VEGF可作为糖尿病肾病患者病情评估有价值的指标,维格列汀可能部分通过调控CTGF和VEGF的表达而发挥肾脏保护作用。

摘要：目的比较经脐单孔腹腔镜与传统三孔腹腔镜卵巢囊肿剔除术的临床效果。方法选取2011年1月至2014年12月卵巢囊肿剔除患者100例,根据手术方式的不同分为经脐单孔腹腔镜组与传统三孔腹腔镜组各50例。分析比较两组患者的手术期指标、手术疗效和术后生活质量。结果两组患者中,传统三孔腹腔镜组平均手术时间较经脐单孔腹腔镜组短,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组术中失血量和切口长度差异均无统计学意义（P〉0.05）。经脐单孔腹腔镜组术后VRS评分、伤口美观指数显著优于传统三孔腹腔镜组,差异有统计学意义（P〈0.05）。传统三孔腹腔镜组住院时间短于经脐单孔腹腔镜组,差异有统计学意义（P〈0.05）。术后并发症发生率两组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论腹腔镜治疗良性卵巢囊肿是安全可行的,且能明显减轻患者术后疼痛,并能达到更好的美容效果。

摘要：目的对比观察超声造影与增强CT对肝脏小占位病变的诊断价值。方法选取48例行普通超声或CT筛查出肝脏小占位病灶（病灶直径小于或等于3cm）的患者,所有患者均完善超声造影及增强CT检查,以穿刺或手术病理检查结果为金标准,分别计算超声造影及增强CT的诊断符合率、漏诊率和误诊率。结果 48例患者中原发性肝癌33例,转移性肝癌10例,肝硬化增生结节3例,血管瘤1例,局灶性结节增生1例。针对原发性小肝癌结果分析,超声造影与增强CT的诊断准确率均为90.9%（30/33）,但超声造影仅有1例误诊,比增强CT少1例;针对转移性肝癌结果分析,超声造影与增强CT的诊断准确率分别为80.0%（8/10）和90.0%（9/10）,超声造影诊断准确率显著低于增强CT,差异有统计学意义（P〈0.05）,同时超声造影误诊1例,误诊率为10.0%,增强CT无误诊病例,差异有统计学意义（P〈0.05）;对肝脏小良性肿瘤,超声造影未能检出本组患者中仅有的1例血管瘤,而增强CT准确诊断出该例血管瘤患者,超声造影准确检出1例局灶增生结节,而增强CT未能检出。结论超声造影与增强CT相比,对肝脏小占位性病变的良、恶性鉴别诊断各有优势,但超声造影经济便捷、无X线片损伤,更适合基层医院推广应用。