摘要:哺乳动物中,TRAF 家族相关的NF-κB 激活因子(TRAF familymember-associated NF-κB activator,TANK)参与调控核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路,在硬骨鱼中,最新研究表明TANK 在青鱼抗病毒天然免疫反应中具有重要的功能,但在模式动物斑马鱼(Danio rerio)中还没有有关TANK 的报道。本研究率先在斑马鱼开展TANK 功能研究,克隆并获得了斑马鱼TANK 基因(Danio rerio TANK,DrTANK),其编码区(coding sequence,CDS)包括1 047 个核苷酸,编码349 个氨基酸。免疫印迹实验显示DrTANK 蛋白大小约50 kD;免疫荧光实验证明DrTANK 主要定位于细胞质中,表明其为一种胞质蛋白;双荧光素酶报告基因研究结果显示,在EPC 细胞中,过表达DrTANK 并不能显著上调干扰素启动子的表达,但聚肌胞苷酸[poly (I:C)]和草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的刺激能显著增强其诱导干扰素启动子的表达活性。本研究结果表明DrTANK在斑马鱼抗病毒天然免疫反应中可能具有重要作用,为后续DrTANK 功能研究奠定了基础。
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