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人突触小体相关蛋白25单克隆抗体的制备及初步鉴定

摘要:目的:制备抗人突触小体相关蛋白25(SNAP25)的鼠源单克隆抗体。方法:利用大肠杆菌表达SNAP25蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备杂交瘤细胞,筛选针对SNAP25的阳性杂交瘤细胞株,鉴定抗体亚型;用杂交瘤细胞株制备腹水单抗,纯化后利用SDS-PAGE检测抗体纯度。结果:表达并纯化得到纯度大于90%的SNAP25蛋白,免疫小鼠后经2轮筛选得到12株阳性杂交瘤细胞株,其中抗体重链包括IgG1、IgG2型,轻链大部分为κ链;选择具有相对较高抗原结合活性的14号杂交瘤细胞株制备腹水,纯化后得到纯度大于90%的抗体。结论:获得1株高纯度的针对SNAP25的鼠源单克隆抗体,为肉毒毒素的检测奠定了基础。

关键词:
  • 人突触小体相关蛋白25  
  • 肉毒毒素  
  • 单克隆抗体  
作者:
孙志杰; 许永亮; 刘凌志; 付楚溪; 熊向华; 毕秀丽; 张惟材
单位:
辽宁大学生命科学院; 辽宁沈阳110036; 军事医学研究院生物工程研究所; 北京100071; 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院; 辽宁沈阳110016; 沈阳师范大学; 辽宁沈阳110034
刊名:
生物技术通讯

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期刊名称:生物技术通讯

生物技术通讯杂志由军事医学科学院生物工程研究所主办,军事医学科学院主管的学术刊物,国内刊号为:11-4226/Q。创办于1989年,双月刊,在全国同类期刊中发行数量名列前茅。其主要栏目有:研究报告、技术方法、综述、其他等。