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三色雷蘑核糖核酸酶的分离纯化和理化性质

摘要:依次采用离子交换层析(DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex 75 HR10/300 GL)从三色雷蘑(Leucopaxillus tricolor)子实体中分离纯化得到一种核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)。该酶比活为1406 U/mg,纯化倍数为154,通过HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到4条肽段序列,分别为DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。该核糖核酸酶的相对分子质量为15000,最适反应pH为 9.0,最适反应温度为40 ℃,热稳定性高,80 ℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu^2+、Ca^2+、Mn^2+、Cd^2+和Al^3+在1.25~10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用,且抑制作用随着金属离子浓度的升高而变强;Fe^2+在1.25~5 mmol/L的浓度下,Pb^2+、Zn^2+、Mg^2+、Hg^2+、Fe^3+在1.25~2.5 mmol/L 的浓度下对该酶的活性有促进作用。

关键词:
  • 酶活力  
  • 氨基酸序列  
  • 相对分子质量  
  • ph  
  • 温度  
  • 金属离子  
作者:
耿雪冉; 张巧毅; 常明昌; 徐丽婧; 程艳芬; 王贺祥
单位:
山西农业大学食品科学与工程学院; 山西太谷030801; 黄土高原食用菌提质增效协同创新中心; 山西太谷030801; 湖南农业大学东方科技学院; 湖南长沙410128; 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室; 北京100193
刊名:
食用菌学报

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期刊名称:食用菌学报

食用菌学报紧跟学术前沿,紧贴读者,国内刊号为:31-1683/S。坚持指导性与实用性相结合的原则,创办于1994年,杂志在全国同类期刊中发行数量名列前茅。