摘要:目的探讨肿瘤坏死因子相关受体因子6(Traf6)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法采用pGPU6/Neo载体构建稳定敲除Traf6的MCF-7细胞株,应用实时定量PCR和免疫印迹验证Traf6基因和蛋白的均低表达,采用细胞计数试剂盒-8(CCK8)法检测MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞周期的变化,蛋白印记法(Western Blot)检测MCF-7细胞中周期蛋白A(Cyclin A)、周期蛋白B(Cyclin B)、周期蛋白依赖激酶(CDK/p34)表达量和转录生长因子β-活化激酶1(TAK1)磷酸化水平。结果使用pGPU6/Neo载体能够稳定的敲除MCF-7细胞中Traf6的表达,敲除Traf6能够抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,将细胞阻滞在G1期,同时抑制细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B及CDK/p34的表达及TAK1磷酸化。结论Traf6表达的降低能抑制TAK1信号通路活性,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖能力。
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