摘要:目的探讨TBX15基因在肝细胞癌中的表达及其启动子甲基化对细胞生物学行为的影响。方法分别采用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)和实时荧光定量PCR(qPCR)检测3种肝癌细胞系(HepG2、MHCC97H、SNU449)中TBX15基因启动子甲基化状态和表达水平,再将空白质粒、空载质粒pc3.1和TBX15过表达质粒转染肝癌SNU499细胞,通过CCK-8实验和流式细胞术检测各组肝癌细胞的增殖和凋亡情况。结果 3种肝癌细胞系中,TBX15基因在肝癌SNU449细胞中的启动子甲基化程度最高,甲基化率为89.5%,而TBX15 mRNA表达水平最低。TBX15过表达质粒组培养48 h后,肝癌SNU449细胞的增殖能力高于空载质粒组,差异有统计学意义(0.549±0.080 vs 0.457±0.506,P=0.015);TBX15过表达质粒组肝癌SNU449细胞的总凋亡比例高于空白质粒组,差异有统计学意义[(5.12±1.42)%vs(2.16±0.41)%,P=0.014]。结论启动子区异常甲基化可能是肝癌细胞TBX15基因失活的主要原因,且与肝癌恶性生物学行为密切相关。TBX15可能是预测肝癌发生发展的指标。
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