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鼠疫一体系双重荧光定量PCR检测方法的建立及评价

摘要:本研究根据鼠疫耶尔森氏菌caf1及YPO0392基因,设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,构建一体系的检测体系,对其敏感性、特异性和稳定性进行评价,并对8份鼠疫阳性及24份阴性DNA样本进行应用评价。结果显示,一体系双重检测鼠疫DNA的敏感度为17.93×10^-5 ng/μL;19份鼠疫菌DNA都有扩增,25份非鼠疫菌DNA都未扩增;对8份阳性现场DNA样本进行检测,一体系检测结果均为阳性;对24份阴性DNA样本进行检测,结果均为阴性。结果表明,本研究成功建立了可同时检测鼠疫耶尔森氏菌caf1和YPO0392基因的一体系双重荧光定量PCR方法,具有良好的敏感性与特异性,操作方便并节约成本,能够代替单基因检测方法。

关键词:
  • 鼠疫耶尔森氏菌  
  • caf1  
  • tpo0392  
  • 双重荧光定量pcr方法  
作者:
董珊珊; 段存娟; 郭英; 石丽媛; 钟佑宏; 李伟; 王鹏
单位:
云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室云南公共卫生与疾病防控协同创新中心; 大理671000; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室; 北京102206
刊名:
中国动物传染病学报

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