HI,欢迎来到好期刊网,发表咨询:400-888-9411 订阅咨询:400-888-1571证券代码(211862)

基于RNA-seq数据的栽培种花生SSR位点鉴定和标记开发

摘要:【目的】鉴定花生RNA-seq数据中的SSR位点,明确转录组中SSR位点的分布和结构特点,开发与花生基因相关联的SSR标记,为花生重要功能基因的挖掘、等位变异研究和分子标记辅助育种奠定基础。【方法】根据栽培种花生全生育期中22种不同类型的组织RNA-Seq数据,使用MISA软件分析SSR位点分布及特征,采用Primer 3设计基因关联的SSR引物,并利用电子PCR软件对引物的质量进行检测,随机合成38对引物,进行多态性检测。【结果】从52280条转录本中共鉴定19143个SSR位点,分布于14084条转录本,发生频率为26.94%。重复单元类型为单核苷酸—五核苷酸,以单核苷酸和三核苷酸为重复单元的SSR位点数最多,分别占位点总数的39.24%和38.40%。各重复单元优势基序类型分别为A/T、AG/CT、AAG/CTT、AAAG/CTTT和AACAC/GTGTT,占所在重复单元中的比例分别为97.62%、72.01%、30.96%、24.59%和16.67%。重复单元的重复次数为5—47次,单个SSR位点的长度的分布范围为10—47 bp,基序长度主要集中在10—14 bp;复合SSR位点的长度范围为21—249 bp,以31—40 bp为主。鉴定的SSR位点中共有13477个SSR位点可以进行引物设计,其中5020条转录本序列对应到特定的基因,共包含5859个可进行引物设计的SSR位点,这些SSR位点在A基因组和B基因组共20条染色体上不均匀分布,其中B03染色体上SSR位点最多,为484个。对特定基因SSR引物进行电子PCR检测,在A.duranensis、A.ipaensis、A.hypogaea基因组中有效扩增位点分别为4468、4929和10188个,有效引物数分别为3968(67.74%)、4232(72.25%)和5174(88.33%)对,在A.hypogaea基因组中,SSR引物扩增位点主要以2个位点为主,其中,有1477对引物单位点扩增。根据SSR引物扩增位点在栽培种花生基因组中的位置信息绘制了SSR位点的物理图谱。在38对SSR引物中,共有35对(92.1%)SSR引物可以扩增出清晰的条带,其中,有11对(28.9%)SSR引物在2个品种间扩增�

关键词:
  • 花生  
  • ssr位点  
  • 基因关联ssr标记  
  • 物理图谱  
作者:
徐志军; 赵胜; 徐磊; 胡小文; 安东升; 刘洋
单位:
中国热带农业科学院湛江实验站/广东省旱作节水农业工程技术研发中心; 广东湛江524013; 中国农业科学院农业基因组研究所; 广东深圳518120
刊名:
中国农业科学

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

期刊名称:中国农业科学

中国农业科学杂志由中国农业科学院;中国农学会主办,中华人民共和国农业农村部主管的学术刊物,国内刊号为:11-1328/S。创办于1960年,半月刊,在全国同类期刊中发行数量名列前茅。其主要栏目有:作物遗传育种·种质资源·分子遗传学、耕作栽培·生理生化·农业信息技术、植物保护、土壤肥料·节水灌溉·农业生态环境、园艺、食品科学与工程、畜牧·兽医·资源昆虫等。