摘要:目的探讨Toll样受体4(TLR4)配体脂多糖(LPS)抑制人滋养层细胞Bewo中乙型肝炎病毒(rtBv)复制的作用机制,为防治HBV宫内感染提供依据。方法首先将2txg1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1(+)-HBV1.3转染Bewo细胞12h后,以TLR4配体LPS处理3d。尔后用LPS处理Bewo细胞,观察IFN—β、TNF-a表达的动力学、NF—KB拮抗剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对LPS诱导Bewo细胞产生细胞因子的作用。采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平,并以ELISA和RT—PCR分别检测IFN-β、TNF—a水平及TIR结构域的转接蛋白(TRIF)、髓样分化蛋白(MyD88)表达。结果与对照组比较,LPS可显著抑制Bewo细胞中HBV复制(P〈0.01),且LPS可显著诱导Bewo细胞产生TNF-a(P〈0.05),呈时间和剂量依赖性。PDTC可抑制LPS诱导细胞产生TNF-a,显著低于对照组(P〈0.01),但对IFN—β无显著作用(P〉0.05)。与对照组比较,LPS可诱导HBV重组质粒转染的Bewo细胞表达MyD88(P〈0.01)。结论通过MyD88/NF—KB信号途径诱导Bewo细胞产生TNF—a,TLR4配体LPS可显著抑制HBV复制。
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