摘要:目的探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型的逆转作用及其机制。方法常规培养HepG2细胞至对数生长期,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察SSd不同浓度、作用不同时间对HepG2细胞增殖情况的影响。实验组选择10mg/L的SSd作用HepG2细胞48h,Giemsa染色法观察细胞形态学改变;化学发光法测定细胞上清液中甲胎蛋白(AFP)浓度;放射免疫法检测细胞上清液中白蛋白浓度;transwell小室实验观察细胞迁移率;RT—PCR检测p27基因mRNA表达。并与空白对照组做比较。数据在多组间比较采用随机分组单因素方差分析,在两组间比较采用t检验。结果10mg/L的SSd作用48h,对HqoG2细胞的生长抑制最明显(F=266.06,P〈0.01)。实验组HepG2细胞形态倾向于正常分化,形态变小、变圆,核变小、变圆或卵圆形,核/质比例缩小。与对照组比较,实验组穿膜细胞数明显减少[(50.60±4.04)个与(41.00±4.64)个,t=-7.32,P〈0.01);细胞上清液中自蛋白含量明显增多[(24.7±2.8)×10-3g/L与(31.1±4.9)×10-3g/L,t=7.83,P〈0.051;AFP含量明显减少[(118.2±15.6)×10^3μg/L与(70.3士5.7)×10^3μg/L,t=-10.72,P〈0.01]。实验组p27基因mRNA的相对表达量明显多于对照组(t=22.00,P〈0.05)。结论SSd对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型具有明显的逆转作用,其机制可能与SSd上调HepG2细胞p27基因mRNA表达使其进入分化过程有关。
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