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颌下腺细胞与丝素-壳聚糖在体内复合培养的动物实验

摘要:目的探讨在丝素一壳聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接种颌下腺细胞后,在大鼠体内构建组织工程化颌下腺的可行性及生物学特性。方法将36只8周龄SD大鼠分成实验组和对照组,每组各18只。取1~3d龄sD大鼠颌下腺原代细胞培养、传代、细胞来源鉴定后,将第二代细胞标记5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5’-BrdU),制备成5×10’个/L的颌下腺细胞悬液,将其接种于5mm×5mm×5mm的SFCS上,体外培养1周后将细胞一支架复合物植入实验组,将单纯SFCS支架植入对照组,分别于3、7、14d处死大鼠后取材,进行大体、组织学、免疫组织化学及扫描电镜观察。结果大体观察:植人物表面被膜覆盖,周围组织反应较轻。组织学观察:随着培养时间延长细胞数逐渐增多,细胞黏附于材料表面或分散在支架内,聚集成集落、呈岛状排列,分泌粉染的细胞外基质。BrdU免疫组织化学观察:术后3个时间点均存在阳性细胞。细胞角蛋白8(cytokeratin 8,CK-8)免疫组织化学观察:术后3个时间点均存在阳性细胞,随时间延长数目逐渐增多。扫描电镜观察:SFCS呈网状结构,植入初期的颌下腺细胞呈圆形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或网孔内;随时间延长,颌下腺细胞表面凹凸不平,细胞数目增多,黏附于材料表面并伸出突起,细胞间相互接触。结论利用SFCS支架接种颌下腺细胞后,可在体内构建组织T程化涎腺样结构,为进一步进行组织工程化颌下腺的研究奠定理论基础。

关键词:
  • 颌下腺  
  • 组织工程  
  • 丝素  
  • 壳聚糖  
作者:
黄巍巍; 谭学新; 李波; 王哲; 李欣宇; 马丽
单位:
中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室; 沈阳110002
刊名:
中华口腔医学

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期刊名称:中华口腔医学

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