摘要：目的探讨在体外大量扩增CD8＋CD28一抑制性T淋巴细胞（Ts细胞）的方法，并检验其免疫调节作用。方法分离健康志愿者全血中CD8＋T淋巴细胞，在含不同细胞因子和异体抗原提呈细胞（APC）的培养条件下进行体外扩增。应用流式细胞术对扩增过程中CD28一细胞亚群的比例进行监测。分为3组进行混合淋巴细胞培养，反应细胞均为CD4’T淋巴细胞：B-Am组以来源于原致敏供者的APC作为刺激细胞，I-APC组以HLA-A、B、DR全错配的无关供者的APC作为刺激细胞，Dynabeads组以包被有抗CD3和CD28单克隆抗体的免疫微球Dynabeads作为刺激细胞；扩增后的Ts细胞作为第三方调节细胞加入混合淋巴细胞培养中，测定其对CIN’T淋巴细胞增殖的抑制作用。结果在含白细胞介素2（IL-2）＋IL-7＋IL-15的培养条件下，CD8＋T淋巴细胞培养后CD8＋CD28T淋巴细胞亚群的比例最高（P〈0．05）。BAPc组不加入Ts细胞时，增殖的CD4＋T淋巴细胞比例为66．7％，当加入的Ts细胞与反应细胞的比例分别为0．5：1、0．1：1和0．02：1时，增殖的CD4＋T淋巴细胞比例分别为16．5％、34．1％和62．6％。Ts细胞对CIN’T淋巴细胞的增殖有明显抑制作用，而在I—Apc组和Dynabeads组中，此抑制作用不明显。结论应用含IL-2＋IL_7＋IL_15的培养条件联合异体APC刺激可以在体外大量扩增Ts细胞，扩增所得Ts细胞在体外对供者CD4＋T淋巴细胞的增殖有明显抗原特异性抑制作用。