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同时产ArmA型16SrRNA甲基化酶及KPC-2型β-内酰胺酶泛耐药阴沟肠杆菌的研究

摘要:目的探讨上海交通大学医学院附属瑞金医院分离的5株泛耐药阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶及16SrRNA甲皋化酶的情况及两者之间的相关性。方法用Etest法检测5株泛耐药阴沟肠杆菌对10种抗菌药物的MIC值。PCR扩增16SrRNA甲基化酶基因armA、mtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA,β-内酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、CTX-M-25、PER-1、VEB-1。鸟枪克隆法克隆碳青霉烯酶基因,并对克隆片段进行测序。质粒接合试验验证碳青霉烯酶基因及16SrRNA甲基化酶基因是否具有转移性。脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对5株菌进行分子分型。等电聚焦电泳法检测β-内酰胺酶等电点。Southern杂交法对耐药决定因子进行定位。结果5株阴沟肠杆菌对10种抗菌药物的MIC值均〉32mg/L。克隆的碳青霉稀酶基因为bla。。,酶编码基因上游为一转座酶基因,两侧为复制靶位,下游为Is蜘桶的插入序列,该序列包括一个重复序列和tnpA转座子,酶编码基因位于54.2kb的一个非接合性大质粒上。等电聚焦电泳显示5株菌均产4种β-内酰胺酶(TEM-1,p15.4;KPC-2,p16.7;SttV-12,p18.2;CTX-M-14,p18.4)。16SrRNA甲基化酶基因位于接合性质粒上,而blakpc-2基因则位于非接合性质粒上,5株菌PFGE型别一致。结论5株泛耐药阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药由产碳青霉烯酶KPC-2所介导。blakpc-2与armA型16SrRNA甲基化酶基因由两条不同的质粒编码,不存在相关性。临床医院应加强监控,以防止交叉感染。

关键词:
  • 阴沟肠杆菌  
  • 碳青霉烯酶  
  • 16s  
  • rrna甲基化酶  
作者:
吴琼 倪语星 韩立中 孙景勇 刘庆中 蒋艳群 高锋
单位:
上海交通大学附属第六人民医院 200233 上海交通大学医学院附属瑞金医院 上海交通大学附属第一人民医院
刊名:
中华微生物学和免疫学

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