摘要:目的探讨胰岛素(Ins)促进结肠平滑肌细胞(SMC)表达干细胞因子(SCF)的细胞内信号传导途径。方法分离培养SD大鼠结肠SMC,采用a-actin免疫荧光鉴定。分3大组进行实验。①Ins浓度梯度组:SMC添加不同浓度Ins(0、2.5、5、20、40和80mg/L),培养16h。②Ins时间梯度组:SMC+Ins(40mg/L),分别培养0、8、16和24h。③信号通路阻断组:SMC加LY-294002或PD-98059预处理后,再予以40mg/L的Ins诱导16h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测结肠SMC增殖情况,Western印迹和反转录PCR检测SCF的变化。结果①Ins在5mg/L浓度即能显著促进SMC增殖,其效应与20、40和80mg/L时差异无统计学意义(P值均d0.05)。②与未添加Ins组(即空白对照组)比较,低中剂量Ins(2.5、5和20mg/L)即有促进结肠SMC表达SCFmRNA和SCF蛋白的作用(P〈0.05),这种作用在Ins40mg/L时达到最大(P〈0.05),80mg/L时与40mg/L时差异无统计学意义(P〉0.05)。③与0h时相比,40mg/L的Ins作用于SMC8h后SCF表达增加(P〈0.05),16h后达峰值(P〈0.05),24h与16h差异无统计学意义(P〉0.05)。④与空白对照组和溶剂对照组相比,LY-294002、PD-98059处理16h,均能减少Ins诱导的SCF的表达(P值均〈0.05)。结论Ins能促进SMC增殖;在一定范围内呈剂量与时间依赖性诱导结肠SMC合成SCF,该效应可能与PI3K与MAPK两条信号通路有关。
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