摘要:目的明确苏南地区非综合征型耳聋患者7个耳聋致病基因突变热点的突变频率,验证中国人群耳聋遗传病因筛查的SNaPshot技术平台的效能。方法以125例非综合征型耳聋(non—syndromic hearing loss,NSHL)患者为研究对象,应用SNaPshot技术,针对GJB2基因235delC和299—300delAT,SLC26A4基因IVS7—2A〉G和2168A〉G,线粒体DNA(mtDNA)1555A〉G、7445A〉G和3243A〉G共7个突变热点在一个反应管中进行多重PCR后,单碱基荧光延伸标记,再采用ABI3130遗传分析仪行毛细管电泳进行基因分型,并利用直接测序和聚合酶链反应-限制性片段长度多态(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)方法验证基因分型结果。结果(1)125例样本中,GJB2基因235delC突变频率为24.0%,299-300delAT突变频率为5.6%;SLC26A4基因IVS7—2A〉G突变频率为15.2%,2168A〉G突变频率为3.2%;线粒体DNA1555A〉G突变频率为4.8%,7445A〉G突变频率为0.8%,未发现线粒体DNA3243A〉G位点突变,7个热点综合突变频率为53.6%。(2)SNaPshot结果与直接测序或PCR—RFLP结果完全吻合,检测的特异性和敏感性均为100%。结论(1)苏南地区耳聋患者7个位点突变频率超过半数;(2)用SNaPshot技术筛查耳聋基因,在一个反应管中同时检测到了7个突变热点,其检测效能高,具有临床应用价值。
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