利用gusA基因在水稻组织中示踪和定量水稻白叶枯病菌的方法

摘要:水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)从自然孔口水孔或者伤口处侵入水稻叶片,在维管束中定殖、繁殖和扩展,引起典型的叶枯症状。可视化这个动态的病程过程和快速定量水稻组织中细菌的群体是Xoo-水稻互作研究中亟待突破的技术难点。本研究在PXO99A菌株中表达gusA基因,将其置于lacZ启动子、hrpX启动子和不含有(T1)4终止子的hrpX启动子下,构建了3个示踪菌株PXO99A AGUSRBS、PXO99GUSA X和PXO99GUSX-。水稻上毒性测定结果显示,这3个示踪菌株与野生型PXO99A展现相同的毒性。利用示踪菌株,通过注射接种法,能够观察到Xoo在水稻维管束中定殖和扩展的动态变化;通过喷雾接种法,能够观察到Xoo从叶尖或者叶缘侵入水稻叶片引起发病的特性;发现PXO99GUSA X和PXO99A AGUSX-比PXO99GUSA RBS能够更加灵敏地反映这些病程。同时发现,PXO99GUSARBS的细菌数量与受其侵染的水稻组织的GUS活性显著正相关。本研究也评价了利用GUS活性测定法精确和快速地定量水稻组织中细菌群体的可行性。以上结果表明这套GUS系统是非常有效的,能够示踪病原菌的侵染过程和监测细菌在水稻组织中的群体数量,这将为Xoo-水稻互作研究提供有力的技术支持。

关键词:
  • 水稻白叶枯病菌  
  • 病程  
  • gusa基因  
  • gus活性  
作者:
李瑜; 李逸朗; 张翠萍; 陈涛; 罗铃滈; 李映斌; 陈功友; 罗坤; 邹丽芳
单位:
上海交通大学农业与生物学院; 上海200240; 湖南农业大学植物保护学院; 长沙410128
刊名:
植物病理学报

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期刊名称:植物病理学报

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