重庆医学杂志   统计源期刊

摘要：当前创新药物研究和发展的理论、方法和关键技术正在迅速兴起，它将有利于提高我国创新药物研究的实力和整体水平。为建立起我国药物研究的自主创新体系，使我国创新药物研究接近或达到发达国家的整体水平是我们面临的重大挑战。因此，应充分利用国际生命科学的最新发展，开展创新药物的基础和应用基础研究，建立高水平的创新药物研究体系，提高药物创新能力。在“关键路径研究”中，实施转换医学研究或转换研究不但影响医药企业的新产品研发过程，也会对研发机制产生深远的影响。特别是提出把握转换研究与新药研发三要素的关系，对提高研发效率十分重要。因而需要科学的支持系统用于评价路径，这些科学支持系统，包括技术标准、研究工具、注册政策和注册的科学标准等，以推进发明的实现。分析药物被淘汰的原因，可以认为转换研究链是关键，现有的动物疾病模型和安全性评价研究方法所获得资料运用到人、到疾病治疗，还有相当距离。其中以动力学研究为主线的ADME／E／T在转换研究链中起着极其重要的作用。

摘要：目的探讨经腺病毒表达载体转染血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）165基因的骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）体内外基因表达的特点。方法构建VEGF基因腺病毒表达载体，将VEGF165基因转染到MSCs中。用RT—PCR法检测转基因MSCs中基因表达情况。结果转基因MSCs及其分化的子代细胞均有VEGF165的表达，并持续2周左右时间。结论经腺病毒表达载体转染VEGF165基因的MSCs在体内外均有良好的基因表达。

摘要：目的通过检测P糖蛋白（P—gP）、多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）、谷胱甘肽转移酶（GST-Ⅱ）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（Topo-Ⅱ）5种耐药基因表达蛋白在儿童常见恶性肿瘤组织中的表达，探讨儿童恶性肿瘤耐药的机制，为临床选择敏感的个体化化疗方案提供实验室证据。方法选择40例儿童常见恶性肿瘤的病理切片标本，采用免疫组化的方法检测5种耐药蛋白（Pgp、MRP1、LRP、GST-Ⅱ、Topo-Ⅱ）的表达，分析常见儿童恶性肿瘤耐药蛋白的表达及差异，分析儿童常见恶性肿瘤多药耐药的机制。结果（1）P—gp在卵黄囊瘤所有结构中都呈高阳性率、高强度的表达，说明P—gp过度表达是造成卵黄囊瘤耐药的主要机制。MRP1所介导的药物耐药性可能为卵黄囊瘤耐药的补充机制。LRP、GSTⅡ在卵黄囊瘤多药耐药机制中可能起着协同作用。（2）横纹肌肉瘤中Pgp、GSTⅡ的表达较其他耐药蛋白高。（3）神经母细胞瘤中Pgp、MRP1、Topo—Ⅱ的表达较高。（4）肾母细胞瘤中LRP、Topo-Ⅱ的表达较其他几种耐药蛋白低。（5）恶性淋巴瘤中5种耐药蛋白的表达均低。结论不同的肿瘤类型具有不同的耐药基因表达特点，其肿瘤细胞的耐药机制也有所差异，可据此科学、合理、高效地选择敏感药物进行化疗，从而达到治愈恶性肿瘤的目的。

摘要：目的观察不同浓度高糖刺激后大鼠肾小球系膜细胞胞内Smad泛素调节因子2（Smurf2）的表达，探讨泛素化降解在糖尿病肾病中的作用。方法将体外培养的大鼠肾系膜细胞分别设正常对照组（葡萄糖浓度5．6mmol／L）、20mmol／L高糖组、30mmol／L高糖组、甘露醇组。分别用realtimequantitativePCR法和细胞免疫荧光染色法及激光共聚焦显微镜检测各组细胞Smurf2的mRNA和蛋白的表达。结果（1）正常对照组系膜细胞Smurf2的mRNA和蛋白表达较弱。（2）高糖组Smurf2的mRNA和蛋白表达较正常对照组增强（P〈0．05），呈浓度依赖性。结论高糖可诱导肾系膜细胞Smurf2表达增强。提示泛素-蛋白酶体途径可能参与了糖尿病肾病的病理进程。

摘要：目的应用磁共振弥散张量成像量化比较不同颅内肿瘤脑浸润程度。方法选择颅内肿瘤62例，其中脑胶质瘤30例，脑膜瘤17例，脑转移瘤15例，诊断均经病理检查证实；建立不同颅内肿瘤的脑浸润病理标准，确定肿瘤病理脑浸润程度；利用MRI常规成像和弥散张量成像（diffusiontensorimaging，DTI）比较，测定肿瘤瘤周水肿区的分量各向异性（fractionalanisotropy，FA值），确定肿瘤影像脑浸润程度；比较分析不同肿瘤间的脑浸润程度差异。结果胶质瘤30例中，按病理脑浸润程度分为重度8例，中度10例，轻度8例，无脑浸润4例；脑膜瘤17例中，有病理脑浸润者7例，无病理脑浸润者10例。平均影像脑浸润值（平均瘤周水肿区FA值）：胶质瘤0．16±0．09，脑膜瘤0．39±0．16，脑转移瘤0．37±0．08；脑胶质瘤瘤周水肿区的FA值显著低于脑膜瘤和脑转移瘤（P〈0．05）。结论从病理分析角度无法横向比较不同类型脑肿瘤的脑浸润程度；从影像量化分析的角度比较，脑胶质瘤的脑浸润程度明显超过颅内非胶质来源肿瘤。

摘要：目的探讨肾病综合征激素抵抗患者肾脏组织中c-Jun和c-Fos的表达及意义。方法根据糖皮质激素治疗效果将45例原发性肾病综合征患者分为3个组：激素敏感组、激素抵抗组、复发后抵抗组，每组15例。用免疫组织化学方法检测45例原发性肾病综合征患者肾组织中c—Jun和c—Fos的表达，并用计算机图像分析系统对结果进行分析。结果复发后抵抗组和激素抵抗组肾组织中c—Jun和c—Fos含量明显高于激素敏感组（P〈0．05）；复发后抵抗组肾组织中c-Jun和c-Fos与激素抵抗组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肾组织中c—Jun和c—Fos的升高可能与原发性肾痛综合征激素抵抗有关；检测肾组织中c—Jun和c—Fos表达变化有助于判断预后和调整治疗方案。

摘要：目的研究Src蛋白在人肝癌细胞株HepG2细胞增殖凋亡过程中的作用。方法应用Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂PP2不同浓度处理HepG2细胞前后，使用免疫组化、流式细胞术、MTT法检测Src蛋白的表达以及HepG2细胞增殖和凋亡情况。结果Src蛋白在HepG2细胞中高表达，用不同浓度PP2处理HepG2细胞后，能够显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖，增加凋亡。结论Src蛋白在人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖凋亡过程中起着重要作用。

摘要：目的观察姜黄素对HL60／ADR以及MCF-7／ADR多药耐药（MDR）的逆转。方法用MTT法观察细胞的生长抑制效应，流式细胞仪检测凋亡以及细胞内阿霉素浓度，RTPCR以及WesternBlot检测Mdrl、MRP基因和Bcl-2蛋白表达。结果加入姜黄素后耐药细胞系逆转指数分别为4．18（HL60／ADR）和3．39（MCF-7／ADR），与单纯应用阿霉素相比差异有统计学意义；流式细胞仪检测显示有明显的促凋亡作用，耐药细胞系内的ADR浓度明显升高；RTPCR以及WesternBlot检测发现姜黄素对上述耐药细胞系的MRP以及Bcl-2表达有抑制作用。结论姜黄素可能作为多药耐药的逆转剂应用于MDR逆转。

摘要：目的探讨磁共振技术液体衰减反转恢复序列（fluidattenuatedinversionrecovery，FLAIR）和氢质子MR波谱（1H—MRspectroscopy，1HMRS）在非典型弥漫性轴索损伤（diffuseaxonalinjury，DAI）临床诊断中的价值。方法选择2002年10月至2008年1月收治的符合本研究纳入标准的颅脑外伤患者58例，根据诊断标准将全部病例分为DAI纽和非典型DAI纽，进行FLAIR和1HMRS检查，再随机选择20名健康成年人作为对照组。观察FLAIR对DAI组及非典型DAI组病例的诊断能力；利用1HMRS比较DAI组和非典型DAI组胼胝体膝部、压部和基底节N-乙酰天门冬氨酸／肌酸和磷酸肌酸（NAA／Or）、胆碱复合物／肌酸和磷酸肌酸（Cho／Cr）、肌醇／肌酸和磷酸肌酸（mlNs／Cr）以及谷氨酸和谷氨酰胺／肌酸和磷酸肌酸（Glx／Cr）等指标的差异。结果较之常规MRI，FLAIR对轴索病灶的发现能力明显提高，非典型DAI组的病灶分布及形态和DAI组类似，两者不同在于非典型DAI组分布于间脑以下水平的病灶明显少于DAI组。DAI组、非典型DAI组和对照组的NAA／Cr与Cho／Cr在胼胝体膝部、压部和基底节部位差异均有统计学意义，mINs／Cr和Glx／Cr在胼胝体膝部和压部差异有统计学意义；和对照组及非典型DAI组相比，DAI组于胼胝体膝部、压部和基底节有NAA／Cr降低和Cho／Cr升高，于胼胝体膝部和压部有mINs／Cr和GIx／Cr升高；和对照组相比，非典型DAI组于胼胝体膝部和压部有NAA／Cr降低和Cho／Cr升高，于胼胝体膝部有mINs／Cr升高，但变化程度均比DAI组低。结论非典型DAI组不仅有和DAI组类似的病灶分布和形态，还在胼胝体部位有与DAI组类似的伤后生化代谢改变，区别在于损伤波及范围和严重程度的不同。表明DAI不仅是重型脑伤的一种，它也存在于轻、中型脑伤中，磁共振技术在非典型DAI诊断中有很大价值。

摘要：目的设计、合成针对雄激素受体（AR）基因的具有高干扰效率的siRNA，观察其对前列腺癌细胞的生长抑制作用。方法设计、合成多个针对AR的siRNA，转染前列腺癌细胞LNCaP，筛选出对AR基因干扰效率最高的ARsiRNA，用RT—PCR检测ARmRNA水平，并计算细胞生长抑制率。结果采用SilencersiRNAConstructionKit成功合成了ARsiRNA，转染LNCaP细胞，筛选出一个对其生长抑制作用最强的siRNA，并证实ARmRNA水平显著下降，LNCaP细胞的生长抑制率为78．2％。结论针对雄激素受体的siRNA可沉默雄激素受体基因，并抑制前列腺癌细胞的生长。

摘要：目的探讨血清白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）水平与冠心病患者冠状动脉病变程度的相关性。方法回顾性分析395例冠状动脉造影患者的临床资料，按照改良Gensini评分分为4组：GO（0分）为对照组，冠状动脉病变程度由轻到重分为G1（0～5分）组、G2（5～10分）组、G3（〉10分）组，并用酶联免疫吸附法（ELISA）检测随机抽取4组中的88例冠状动脉造影患者血清IL-8水平。结果G1～3组血清IL-8水平分别为（320．06±243．19）pg／mL、（983．40±579．09）pg／mL（1401．61±645．05）pg／mL，有逐渐增高的趋势；GO组测得值为（473．14±202．97）pg／mL，与其他3个组相比差异均无统计学意义（P〉0．05）；G2组、G3组与G1组相比血清IL-8水平差异有统计学意义（P〈0．05）。但是，在校正了其他心血管危险因素包括年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压史、糖尿病史、血压、血脂、血糖水平的影响之后，IL-8与冠心病病变程度无显著相关（r=0．029，P〉0．05）。结论血清IL-8水平的增高与冠状动脉病变程度有-定相关性，但不能作为冠状动脉病变程度的独立预测因素。

摘要：目的探讨血管性痴呆（VD）的危险因素和临床诊治。方法对采取药物、康复及高压氧等综合治疗措施治疗的VD患者85例进行临床分析总结。以Logistic回归模型分析各种危险因素如高血压、糖尿病、冠心痛、短暂性脑缺血发作等与VD的关系。以MMSE、HDS、BDS、ADL量表评价其疗效。结果85例患者经过综合治疗，85％的患者临床痴呆症状均有明显改善。治疗后MMSE、HDS、ADL评分较治疗前显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；BDS评分较治疗前显著下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论贫血、高血压、糖尿病、短暂性脑缺血发作和冠心病与VD有关，可能是VD的独立危险因素。采取综合治疗措施可以显著提高VD的治疗效果。

摘要：目的探讨血必净注射液对大鼠百草枯（PQ）中毒急性肺损伤（ALI）的保护作用及其机制。方法SD大鼠60只，随机分为对照组、百草枯组和血必净组，每组30只。百草枯组和血必净组大鼠腹腔内注射百草枯，对照组注射等体积无菌生理盐水，血必净组同时给予血必净治疗。3d后测支气管肺组织NFKB活性细胞、支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）活性和肺叶湿／干重比。结果百草枯组和血必净组支气管肺组织NF—κB活性细胞、支气管肺泡灌洗液中总细胞数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、BALF-NE和肺叶湿／干重比均较对照组增高，差异有统计学意义（P〈0．05），血必净组各指标明显低于百草枯组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血必净可抑制NF—κB及炎性细胞活性，对百草枯中毒大鼠急性肺损伤有治疗作用。

摘要：目的构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒，并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增HPV16E6E7片段，将该片段插入到pMDT-18载体中后，亚克隆至真核表达载体pSG．SS．C3d3．YL和pSG．SS．YL，构建E6E7与C3d3融合基因及E6E7表达质粒pSG．SS．E6E7．C3d3．YIJ和pSG．SS．E6E7-YL。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定后，将重组质粒pSG．SS．E6E7．C3d3．YL、pSG．SS．E6E7．YL转染COS-7细胞，用Westernblot及免疫细胞化学技术检测其表达。结果经酶切、DNA测序及转染真核细胞后表达产物的鉴定结果显示，重组质粒构建成功。结论构建的质粒可在真核细胞内正确表达，为其作为DNA疫苗诱导免疫效应的动物实验打下了基础。

摘要：目的探讨哮喘患者CD4＋CD25＋T调节细胞的作用是否存在缺陷及药物（地塞米松、小剂量氨茶碱）对其作用的影响，为有效控制哮喘提供依据。方法分离哮喘患者及健康对照者外周血CD4＋CD25＋T调节细胞及CD4＋CD25＋T淋巴细胞并培养，设CD4＋CD25＋T调节细胞组、CD4＋CD25＋T淋巴细胞组及CD4＋CD25＋T调节细胞联合CD4＋CD25＋T淋巴细胞组，第3组又分为氨茶碱干预组、地塞米松干预组及空白对照组，72h后取培养上清液用ELISA法检测IFN-γ、IL-5、IL-13水平。结果健康对照者CD4＋CD25＋T调节细胞可抑制IFN-γ、IL-5及IL-13的生成（P〈0．01），哮喘患者仅抑制IFN-γ、IL-5的生成（P〈0．01）；地塞米松预处理CD4＋CD25＋T调节细胞后，健康对照者CD4＋CD25＋T调节细胞抑制IFN-γ（P〈0．05）、IL-5（P〈0．01）、IL-3（P〈0．01）生成能力增强，哮喘患者抑制IL-5、IL-13生成能力增强（P〈0．01）；采用氨茶碱预处理后，健康对照者CD4＋CD25＋T调节细胞抑制IL-5（P〈0．01）、IL-13（P〈O．05）生成能力增强，哮喘者抑制IL-5的能力增强（P〈0．01）。结论哮喘患者CD4＋CD25＋T调节细胞在抑制Th2型细胞因子产生方面存在部分功能缺陷；地塞米松可增强健康者和哮喘者CD4＋CD25＋T调节细胞抑制Th2型细胞因子的能力；氨茶碱可增强健康者CD4＋CD25＋T调节细胞抑制Th2型细胞因子的能力，部分增强哮喘者CD4＋CD25＋T调节细胞的该抑制能力。