中国药师杂志统计源期刊

摘要：目的：探讨大黄素（EM）在转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激的人肾小管上皮细胞（HK-2）纤维化相关蛋白表达的机制。方法：HK-2细胞随机分为正常对照组、TGF-β1刺激的模型对照组和大黄素（TGF-β1＋EM）组。采用ELISA法检测培养细胞上清液中CollageⅠ和Fibronectin的含量。TGF-β1刺激HK-2细胞24 h后收集细胞用于免疫荧光、免疫印迹Western Blot和实时荧光定量PCR（RT-PCR）分析。Western Blot印迹法分别检测Ak/TOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR的表达; RTPCR法分别检测Ak/TOR通路蛋白PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达;免疫荧光检测PI3K在HK-2细胞模型中的表达。结果：与模型对照组相比,大黄素组细胞培养液上清中CollageⅠ和Fibronectin的含量明显减少（P 〈0. 05）;抑制PI3K蛋白表达水平增加,降低其下游p-Akt蛋白表达,进而降低下游mTOR蛋白表达,差异有统计学意义（P 〈0. 05）; PI3K、p-Akt和mTOR mRNA的表达水平降低,差异有统计学意义（P 〈0. 05）; PI3K荧光表达减少。结论：大黄素干预TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化模型后,可以通过抑制自噬经典Ak/TOR通路,对细胞损伤有缓解作用,为进一步探索其机制奠定基础。

摘要：目的：研究黄连素对CYP3A4和P-gp的调控是否通过孕烷X受体（PXR）途径。方法：利用PXR慢病毒干扰质粒pLKO. 1-PXR转染包装细胞293T制备重组慢病毒,感染人肝癌细胞HepG2。根据pLKO. 1载体特性,采用嘌呤霉素筛选得到稳定干扰PXR表达的HepG2细胞。采用实时荧光定量PCR法和Western Blot法检测经由黄连素处理的HepG2细胞和PXR基因沉默细胞的CYP3A4及P-gp的mRNA水平和蛋白表达。结果：细胞转染质粒后,其PXR蛋白表达均显著下降（P 〈0. 01）,但CYP3A4和P-gp的蛋白表达差异无统计学意义（P〉 0. 05）。黄连素对PXR基因沉默细胞的CYP3A4、P-gp蛋白和mRNA表达的抑制效应较HepG2细胞显著减弱（P 〈0. 05或P 〈0. 01）。结论：黄连素可通过PXR信号通路调控CYP3A4和P-gp的表达,但并非唯一途径。

摘要：目的：运用整合药理学平台挖掘中药防己潜在高血压基因靶点,研究中药治疗高血压的分子机制。方法：运用整合药理学平台具有的目标预测和网络建设的功能模块,计算获得防己的成分-靶标网络,并进一步计算出防己-高血压相关靶标网络,探索研究防己作用的高血压相关靶标分子机制。结果：防己共挖掘获得198个与高血压相关的靶点,其中化学成分潜在作用节点59个,已知作用节点20个,明确存在直接作用的节点有血管紧张素Ⅱ2型受体（AGTR2）、血管紧张素Ⅱ1型受体（AGTR1）、前列环素受体（PTGIR）、溶质载体家族12成员3（SLC12A3）、内皮素-1（EDN1）。防己化学成分GO富集和KEGG通路富集显示与高血压存在密切的关联性,靶标分子机制较为清晰。结论：通过整合药理学平台,深度挖掘了中药防己化学成分疾病作用靶点,研究了其潜在分子机制,寻找到潜在的影响因素,为进一步研究提供方向指南。

摘要：目的：探讨抗癫痫药丙戊酸钠（VPA）对戊四氮（PTZ）致痫模型大鼠海马组织中粘着斑激酶（FAK）、FAK-pY397表达水平的影响。方法：将75只大鼠随机分为正常对照组,模型组,VPA低、中、高剂量组（150,300,600 mg·kg^-1·d^-1） 5组,每组15只。造模大鼠连续腹腔注射戊四氮32 mg·kg^-1·d^-14周,密切观察大鼠行为学变化。造模成功后,VPA各组给予相应剂量VPA灌胃,连续2周。苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠海马组织变化;免疫组化及酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠外周血清及海马组织中FAK、FAK-pY397及整合素表达情况。结果：与模型组比较,VPA各组癫痫症状有明显缓解,细胞凋亡情况有所改善;免疫组化发现VPA组FAK-pY397的表达明显下降,且随着VPA剂量的加大,FAK-pY397的表达有下降趋势,ITGα3表达组间无显著差异; VPA低、中、高剂量组海马组织中FAK,FAK-pY397及整合素ITGβ1表达水平下降,差异具有显著性（P 〈0. 05）;外周血清中FAK及整合素ITGβ1蛋白表达水平显著下降（P 〈0. 05）,但FAK-pY397表达无明显变化。结论：VPA可能通过抑制癫痫大鼠海马组织中FAK-pY397及ITGβ1的表达,参与或影响癫痫过程。

摘要：目的：建立测定人血清中多奈哌齐和卡巴拉汀浓度的方法。方法：200μl血清样本采用600μl乙腈沉淀蛋白,离心取上清后,采用HPLC-M/S测定,以氯雷他定为内标,色谱柱为Waters Xselect CSH C18（150 mm×3 mm,2. 5μm）,流动相为水（含10 mmol·L^-1乙酸铵）-乙腈（20∶80）,流速0. 4 ml·min^-1,柱温40℃,进样量10μl,采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,以[M＋H]＋作为分子离子峰,用于多奈哌齐和卡巴拉汀定量的反应离子对分别为/ 380. 1→/91. 1和/ 251→/ 206. 5,用于内标定量的反应离子对为/ 383. 1→/ 337. 1。结果：两种药物在0. 5-400 ng·ml^-1范围内线性关系良好（r〉 0. 99）,定量下限均为0. 5 ng·ml^-1;多奈哌齐的日内、日间精密度为2. 06%-12. 51%,相对偏差（RE）为-6. 60%-4. 20%,提取回收率为80. 76%-96. 17%,RSD 〈15%。卡巴拉汀的日内、日间精密度为1. 69%-9. 31%,RE为-5. 58%-5. 20%,提取回收率为96. 69%-100. 15%,RSD 〈15%。多奈哌齐和卡巴拉汀血清样品在经历3次冻融（-40℃到室温）循环、-40℃放置75 d条件下均稳定,处理后样品在自动进样器中（4℃）放置5 h均稳定（RSD 〈15%）。结论：该方法快速、准确、灵敏度高、专属性强,可应用于血药浓度测定和人体药物动力学研究。

摘要：目的：比较健康受试者空腹、餐后单剂量口服吡非尼酮胶囊的药动学。方法：健康受试者12名（男女各半）,随机交叉空腹、餐后单剂量口服吡非尼酮胶囊400 mg,HPLC法测定其血药浓度,DAS v2. 0软件计算药动学参数。结果：空腹和餐后单剂量口服吡非尼酮胶囊的药时曲线均符合一级吸收的一室模型。空腹和餐后服药的药动学参数：t1/2分别为（2. 16±0. 47）,（2. 05±0. 42） h; tmax分别为（0. 69±0. 16）,（1. 46±0. 40） h; Cmax分别为（12. 95±1. 79）,（9. 16±2. 87） mg·L^-1; AUC_（0-12）分别为（44. 97±15. 06）,（36. 19±14. 44） mg·h·L^-1; AUC0-∞分别为（46. 55±16. 79）,（37. 41±15. 43） mg·h·L^-1。与空腹给药组比较,餐后服用吡非尼酮胶囊可以显著延长药物tmax（P 〈0. 001）,降低其Cmax（P 〈0. 001）和AUC（P 〈0. 01）。结论：进食对吡非尼酮胶囊药动学具有显著影响,可减慢其吸收速率,并降低其吸收程度,与患者耐受性更好相关。

摘要：目的：探讨同时提取西洋参药材中总多糖和总皂苷的最佳工艺。方法：以西洋参药材中总多糖和总皂苷含量为考察指标,选择乙醇浓度、提取时间、料液比以及提取次数为考察因素,用单因素试验确定因素水平;再以乙醇浓度、料液比以及提取次数为考察因素,用正交试验对最佳工艺提取进行优化。结果：最佳提取工艺条件为：乙醇浓度40%,料液比1∶12,提取次数3次。结论：本研究中所优选的工艺简便、快捷、稳定,可用于同时提取西洋参药材中总多糖和总皂苷。

摘要：目的：分析续断及其酒灸品中挥发性成分的组成和含量。方法：采用顶空固相微萃取法（HS-SPME）结合气质联用技术（GC-MS）对续断及其炮制品挥发性成分进行分析鉴定,用面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果：共鉴定出31种成分,主要为酚类、烯类、醇类和醛类。从续断挥发性成分中分离出25个峰,鉴定出22个成分,占总挥发性成分的94. 74%,含量最高的是丁香酚,占总挥发性成分的28. 37%;从酒灸品中分离出23个峰,鉴定出17种成分,占总挥发性成分的85. 92%,含量最高的为壬醛,占总挥发性成分的9. 66%。结论：续断及其酒灸品的挥发性成分组成和含量差异较大,本试验为续断及其酒灸品挥发性成分进一步研究开发提供科学参考依据。

摘要：目的：构建TNF-α rs1800620（SNP1）和TNF-α rs4645843（SNP2）稳转株的细胞模型,研究SNPs对LX-2细胞系内TNF-α含量的影响。方法：利用野生型TNF-α定点突变合成TNF-α SNP/NF-α SNP2突变型质粒,慢病毒包装后转染至LX-2细胞株构建稳转株,分别采用RT-qPCR和Western blot检测各重组细胞中TNF-α mRNA和蛋白水平。结果：基因测序表明突变型质粒构建成功,倒置显微镜拍照表明细胞有绿色荧光表达稳转株构建成功,RT-qPCR和Western blot检测结果表明与野生组比较,SNP1、SNP2均能显著降低TNF-α mRNA和蛋白水平（P 〈0. 05）。结论：稳定表达TNF-α/NF-α SNP/NF-α SNP2 LX-2细胞模型构建成功,且SNP1、SNP2均能显著降低TNF-α mRNA和蛋白水平。

摘要：目的：考察焦亚硫酸钠溶液浸泡前后黄芪中黄酮类成分的变化,确定焦亚硫酸钠溶液浸泡对黄芪药材质量的影响,为评价焦亚硫酸钠溶液浸泡加工对黄芪质量的影响提供依据。方法：对收集的黄芪进行焦亚硫酸钠溶液浸泡加工,采用HPLC-DAD方法,建立黄芪中4种黄酮类成分的含量测定方法。结果：黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素、紫檀芪线性范围分别为0. 048-60. 000μg·ml^-1、0. 019-30. 000μg·ml^-1、0. 019-40. 000μg·ml^-1、0. 019-40. 000μg·ml^-1。焦亚硫酸钠浸泡过的黄芪和正常组相比,毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷类成分均显著下降,并且随着焦亚硫酸钠浓度的增大和浸泡时间的增加,含量降低趋势明显,高浓度组相差2-3倍左右;焦亚硫酸钠浸泡对芒柄花素成分的影响相对较小,但紫檀芪高浓度浸泡组与正常组的含量可差10倍左右。结论：焦亚硫酸钠处理对黄芪药材的化学品质具有一定程度的负面影响,特别是对有效成分具有显著的降低作用,因此,采用焦亚硫酸钠溶液浸泡黄芪来达到保鲜、防蛀、延长保质期的作法不可取。

摘要：目的：制备盐酸地芬尼多双层渗透泵片,并对该制剂的体外释药行为进行考察。方法：测定各处方的累积释放度,以累积释放量和f_2相似因子作为评价标准,采用单因素试验筛选盐酸地芬尼多双层渗透泵片的片芯处方和包衣工艺。结果：盐酸地芬尼多双层渗透泵片的释药行为受含药层聚氧乙烯（PEO）含量、氯化钠含量及包衣增重等因素影响。片芯优化处方含药层氯化钠为10 mg,PEO-N10为15 mg;助推层PEO-WSR303为60 mg,氯化钠为20 mg;包衣液优化处方PEG4000为1. 25 g·L^-1;包衣增重为片芯重量的7%。优化处方在2-12 h内零级特征明显,释药方程为：Q=6. 308t-2. 503 7（r=0. 995 8）。结论：研制的盐酸地芬尼多双层渗透泵片制备工艺稳定,体外释药特征符合零级模型。

摘要：目的：建立五味子药材质量评价新标准。方法：在中国药典2015年版五味子药材标准基础上进行提高,增加了特征图谱（HPLC法）、总木脂素含量测定（紫外分光光度法）。结果：以五味子醇甲为参照物,构建了由7个特征峰组成的五味子药材HPLC特征图谱;总木脂素含量以五味子醇甲计,不得少于1. 8%。结论：所建立的质量评价新标准检测项目更加全面,重现性好,能够为五味子药材及其相关制剂的质量评价提供更科学的评价手段。

摘要：目的：应用粉末X-射线衍射法对甘氨酸原料药中α晶型的含量进行定量分析,为多晶型研究提供实验依据。方法：分别选择α晶型的特征衍射峰2θ=19. 1°与γ晶型特征衍射峰2θ=25. 4°的峰强度比值为定量参数,建立标准曲线,测定α晶型的含量。结果：获得甘氨酸α晶型与γ晶型的表征图谱,α晶型的线性范围为1%-99%（r=0. 996 7）,平均回收率为102. 8%（RSD=4. 0%,n=9）。结论：所建方法准确可靠,快速简便,可用于甘氨酸原料药中α晶型的定量分析。

摘要：目的：建立丁香药材的高效液相指纹图谱研究方法,为全面整体地评价丁香药材质量提供参考。方法：采用HPLC色谱法,以丁香酚为参照峰,通过对HPLC条件的摸索和考察,以乙腈-0. 2%磷酸为流动相进行梯度洗脱,确立丁香药材指纹图谱研究方法。结果：通过HPLC色谱分析共得到17个共有峰,标定了丁香酚、阿魏酸、槲皮素、山奈酚和异鼠李素等5个共有成分,且10个不同产地丁香药材色谱图相似度均在0. 900以上,符合指纹图谱相似度评价的基本要求。结论：本研究为完善丁香的质量评价体系提供了实验依据,为全面整体评价丁香药材质量提供了参考。

摘要：目的：利用HPLC法考察^60Co-γ射线辐照灭菌对通脉颗粒中丹参素、原儿茶醛、葛根素和丹酚酸B4个成分含量的影响。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18（2）色谱柱（250 mm×4. 6 mm,5μm）,流动相为A-乙腈,B-0. 1%磷酸水溶液系统,梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为1. 0 ml·min^-1,柱温为35℃。分别选择剂量为0,2,5,10 kGy的^60Co-γ射线进行辐照,比较辐照前后活性成分含量变化。结果：通脉颗粒中丹参素、原儿茶醛、葛根素和丹酚酸B分别在0. 098-4. 925μg、0. 028-1. 411μg、0. 378-18. 882μg、0. 218-10. 888μg范围内呈良好线性,平均加样回收率分别为99. 8%,97. 7%,99. 9%,99. 9%。辐照剂量不超过2 kGy时,各组分含量无显著变化（P〉 0. 05）;辐照剂量为5 kGy时,原儿茶醛和丹酚酸B含量在辐照前后变化显著（P 〈0. 05）。结论：为保证药品安全有效,采用^60Co-γ射线对通脉颗粒进行灭菌时,辐照剂量不宜超过2 kGy。